1.2試驗方法

1.2.1菌懸液制備將大腸桿菌傳代培養(yǎng),取第3代營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物,用5 ml滅菌生理鹽水將菌苔洗下,充分混混后制備成試驗濃度的菌懸液。

1.2.2檢樣制備用滅菌生理鹽水將實驗菌液稀釋

至103 ~103 cfu/ ml不同含菌量的菌懸液,以常規(guī)活菌計數(shù)法測定含菌量。將各紙巾檢樣分為A、B組，每種每組3份,在每份檢樣中滴染不同濃度菌懸液l ml,在無菌室內(nèi)自然晾干,備用。

1.2.3檢測方法①生理鹽水稀釋法:將B組染菌檢樣剪碎后加入到200 ml滅菌生理鹽水中,充分混勻,制備成生理鹽水樣液。取樣液1 ml接種無菌平皿,倒人冷卻至45℃的熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15~20 ml混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉平皿置37℃培養(yǎng)48 h,觀察結果,計數(shù)平板菌落數(shù)并計算出細菌總數(shù)。均質(zhì)器處理法:將A組染菌檢樣剪碎后加入到200 ml 滅菌生理鹽水中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1 ~2 min,制備成生理鹽水樣液。按上述方法接種培養(yǎng)。③結果計算:要求每個平板上菌落數(shù)在30~300 cfu/平板之間,按以下公式計算結果:細菌總數(shù)=平板菌落數(shù)×稀釋度。